草鱼（Ctenopharyngodon idellus）属辐鳍鱼纲鲤形目鲤科草鱼属草鱼，作为我国“四大家鱼”之一，是重要的淡水养殖鱼类。根据《2020中国渔业统计年鉴》，我国全年淡水养殖主要鱼类产量中草鱼2019年产量为5533083吨，占总量的18%。但是近年来各种疾病的发生严重影响了草鱼养殖。因此，研究草鱼的免疫器官的发育过程不仅对防控草鱼的病害有重要意义，也为鱼类生理学做到参考意义。

一．实验方法：

文献中应用常规石蜡切片及HE染色法研究观察了草鱼从孵化成仔鱼至103dph(出膜后日龄)幼鱼的免疫器官：胸腺、肾脏（头肾和体肾）、脾脏的发育。

二．实验结果：

（一）胸腺的发育：

孵化后第5天，草鱼开始出现胸腺原基；第19天，已基本形成了由上皮，外区和内区的三层结构；第35天可见胸腺完全分为两叶即鳃腔叶（AL）及肌间叶（IL），第45到55天时，胸腺中可见血胸屏障及黑色素巨噬中心；55天后, 幼鱼的胸腺与成鱼相似，胸腺的两叶各自继续分叶，未见胸腺小体。

图1：出现胸腺原基

图7：形成上皮（Ep）、外区(IZ)和内区(OZ)

图9：胸腔分为两叶

图10：微血管周围分布有黑色素细胞

图11：皮质中可见血胸屏障

图12：胸腺已与成鱼相似

（二）头肾的发育：

草鱼肾脏的发育大体上分两个阶段：前肾期、中肾期。草鱼肾脏从前肾朝头肾和中肾肾两个不同的方向发育头肾逐渐发育为具有免疫组织及肾上腺组织的混合型器官，中肾形成比前肾更先进的泌尿结构伴随拟淋巴组织的增殖。

孵化的第1天，在头肾的位置可见原肾管，原肾管分化出具有分泌功能的肾小管，之后部分肾小管逐渐退化，被头肾吸收，至第65天，完全退化消失。草鱼头肾原基在第 6天出现，并开始淋巴化，之后造血干细胞逐渐分化为淋巴细胞、粒细胞、红细胞及少量巨噬细胞。第40天，头肾中出现数个肾上腺细胞团，之后肾上腺细胞逐渐增多，形成数层索状包裹于微静脉及静脉周围。

图15：开始形成头肾原基

图21：头肾中出现数个肾上腺细胞团

（三）体肾的发育：

孵化第1天，可见一条直达躯干后部的原肾管构成，背侧有大血管，原肾 管前端管壁细胞排列疏松，与体腔及血管有间隙相同，部分管壁细胞基底部有纤毛结构。第3天，形成一条直达泄殖腔的原肾管构成，前端与血管相邻，管腔窄，管壁为立方上皮，细胞核位于细胞中心，核呈圆形或椭圆形，可见核仁位于中心或散步与核膜下，可见分裂相，胞质弱嗜酸性（淡粉红色）。第4天，管腔增大。

原肾管周围可见扁平或圆形的嗜碱性细胞（淡粉红色）。第5天，与血管相邻，原肾管外围见造血干细胞团及原红细胞。黑色素细胞腹膜开始形成。第6天，原肾管管腔内出现细胞。管腔外扁平上皮膜上出现明显的黑色素细胞。管腔外拟淋巴组织增多，血管中可见大量红细胞。第7天，肾间质大幅增多，可见粒细胞，红细胞，毛细血管及大量分裂相，紧邻原肾管管壁及肾间质中可见零散分布管状未分化细胞团（细胞质嗜碱性），肾间质与原肾管间存在大量空白区。

图23：原肾管(Pr)形成 图24：原肾管周围可见扁平或圆形嗜碱性细胞（淡粉色）

图25：管腔外扁平上皮膜上出现明显的黑色素细胞

图26：肾间质和原肾管之间存在大量的空白区（BA）

肾脏的发育为肾实质的发育及拟淋巴组织的发育。肾脏在第1到7天，前肾作为泌尿器官，之后中肾逐渐发育，形成肾小管、肾小体，前肾管分化为输尿管和膀胱，至第27天，肾小管仍在继续分化，可见初始的输尿管及膀胱，中肾替代前肾行使泌尿功能。另外在体肾发育至4天可见造血干细胞，之后造血干细胞分化为各种血细胞，血细胞分布在体肾间质成为拟淋巴组织。

（四）脾脏的发育：

草鱼脾脏原基在第6天出现，由间充质细胞及造血干细胞组成，并包绕着胰腺组织。此后，间充质细胞逐渐分化增殖为扁平上皮被膜及小梁，血管壁及成纤维细胞；造血干细胞逐渐分化增殖为各类血细胞；部分胰腺组织逐渐随结缔组织深入脾脏小叶间。至第103天，脾脏结构与成鱼一致，成为由血管系统、红髓以及呈团块散布的胰腺组织构成。

图32：出现脾脏原基

图40：脾脏血窦中可见少量黑色素巨噬中心

三．小结：

本篇文章运用 HE 染色法对草鱼日龄1-103天的免疫器官：头肾、体肾、脾脏及胸腺的发育研究表明；草鱼的免疫淋巴器官的发育时间顺序为：胸腺原基最早形成，然后是头肾和脾脏；其免疫器官淋巴化的顺序(即小淋巴细胞的出现顺序) 为胸腺，头肾；脾脏。草鱼胸腺在孵化第19天已形成类似哺乳动物 胸腺的皮质和髓质的结构，随着发育胸腺分化出胸腺小叶。脾脏发育伴随着胰腺组织由外围包裹至深入脾脏结缔组织的过程。间充质细胞及造血干细胞逐渐分化由血细胞特别是红细胞及血管系统组成的脾脏，脾脏再分化出大量的脾小叶结构。胸腺至第55天，头肾和脾脏至第65天已发育出基本完整的组织结构。第75天左右，各免疫器官已具有基本完整的组织结构。

来源：水生动物健康评估 作者：许馨兰