大银鱼人工繁殖技术研究

王煜恒 ，陈军 ，王会聪 ，张坤 ，李华

（1.江苏农林职业技术学院畜牧兽医学院，江苏 镇江 212400；2.句容市华南水产养殖专业合作社，江苏 镇江 212400）

当前大银鱼资源面临着资源量上升到一定高度后会急剧下跌，并且几年得不到恢复，甚至出现绝产的现象。大银鱼在自然情况下自身繁殖，受精率及孵化率都非常低，一般都在10%以下，而以前移植过银鱼的水库在移植之后基本依靠大银鱼自繁自育，这是目前大银鱼资源量下降的主要因素之一。因此急需相关人员对已形成种群的大银鱼资源采取新的技术和方法进行合理保护，保持资源稳定与持续高产的研究已成为水库生态资源保护和开发的一大课题。该试验将探索开展人工授精的鱼卵进行室内人工孵化，并对孵出的仔鱼进行人工培育，以期提高鱼苗孵化率、出苗率以及增殖存活率。

1 材料与方法

1.1 场地和鱼卵

试验场地为句容市华南水产有限公司养殖基地内。试验所用大银鱼卵来自宿迁洪泽湖（泗洪县半城镇）和句容墓东水库。洪泽湖鱼卵于2019年1月9日采集，句容墓东水库鱼卵于2019年1月15日采集。

1.2 鱼卵的采集

亲鱼用单层刺网捕捞，1 h收集1次，收获后立刻送至岸边进行半干法人工授精。亲鱼按雌雄比例3∶1搭配，30尾雌鱼一组，首先将亲鱼用5%的盐水消毒，然后用毛巾擦干体表水分，挤压雌鱼生殖腔将鱼卵置于干净塑料袋内，随后将10尾雄鱼生殖腔剪开后放入卵粒中用毛笔轻轻搅动，加入少量0.7%的生理盐水，塑料袋充气后摇晃30 s，完成授精。受精卵静置2～4 min后，用湖水冲洗2～3次，洗掉剩余精液和未成熟卵子及其他污物，最后开始孵化。

1.3 孵化管理

该试验采用了4种孵化方式，分别为水库网箱、水泥池、室内网箱、塑料箱4种孵化方式。其中后3种方式均在室内开展，并提供微流水环境，水源为水库水，经过滤后转入蓄水塔中。水库网箱为100目纱绢制成，长宽高分别为2 m×2 m×2 m，孵化时网箱上端离水面0.2 m；水泥池的长宽高分别为4 m×2 m×1 m，孵化时保持水深0.5 m；室内网箱置于前述水泥池内，长宽高分别为1 m×1 m×1 m，孵化水深0.5 m；塑料箱的长宽高分别为0.6 m×0.5 m×0.4 m，保持水深0.25 m。为了便于统计相关数据，每种孵化方式中独立设置3个长宽高分别为0.3 m×0.3 m×0.3 m小网箱置于其中，塑料箱中放3个同体积的小塑料箱，每个小箱放入1 000个受精卵，用于计数孵化率和出苗率。

1.4 苗种培育

仔鱼孵出后第4 d点数，第12 d后具平游能力时收集1200尾用于开口饵料的试验，其余均投入水库。试验分成4组，分别为对照组（不投喂）、饵料组（选用蛋黄、轮虫和卤虫3种饵料），每组3个盆（直径40 cm，水深10 cm），每盆100尾同一批次的仔鱼，试验期间每天换1/2的水。试验开展40 d，结束后计数成活的仔鱼数，统计各组成活率。

1.5 指标测定

孵化时间是指同批次受精卵中50%孵化出膜是所用的时间。

受精率/%=受精卵数量/鱼卵总数×100%；

孵化率/%=孵化仔鱼数/受精卵数量×100%；

出苗率/%=平游仔鱼/受精卵数量×100%；

仔鱼成活率/%=仔鱼存活数/仔鱼总数×100%。

1.6 数据统计与分析

原始数据经Excel 2003初步整理后，用SPSS 18.0对数据进行单因子方差分析（one-way ANOVA），用Duncan氏多重比较检验分析组间差异统计学意义性程度，P＜0.05为差异具统计学意义。数据用平均值±标准差（Mean±SE）形式表示。

2 结果与分析

2.1 两次受精的基本情况

洪泽湖鱼卵受精结束后，在当地稳定1天后带水运回句容基地孵化，句容墓东水库鱼卵采集结束后就地开展孵化。大银鱼受精卵直径为0.9 mm左右，1 mL卵数约为1 200粒左右，根据受精卵总体积进行估算其总数。受精2 d开始计算受精卵的受精率，此时受精卵表现为细胞圆满膨胀形成清晰的卵周隙，未受精卵则畸形或者无卵周隙。每批卵中随机选择100个受精卵在显微镜下观察计数，计数3次取平均值。由表1可知，洪泽湖采集的的鱼卵数在654万左右，受精率为58.67%，远高于墓东水库的30.67%，且后者仅采集到72万粒鱼卵。各孵化设施中的投卵情况见表2，平均投卵密度为20万粒/m2。

表1 受精卵采集情况

表2 投卵情况

2.2 不同孵化方式对孵化率和出苗率的影响

由表3可见，洪泽湖的大银鱼卵在四种孵化方式中孵化率和出苗率分别高于墓东水库鱼卵的四种方式。室内开展的3种孵化方式孵化率和出苗率都要高于室外孵化方式，其中室内水泥池的孵化率和出苗率最高，室内水泥池网箱孵化次之，室内塑料箱孵化方式要低于前2种方式。在孵化时间上，两个地区的鱼卵差别不大，但是室内孵化方式均要短于室外孵化方式。

表3 不同孵化方式对孵化率和出苗率的影响

2.3 不同饵料对仔鱼成活率的影响

从表4中可发现，对照组的仔鱼成活率仅为9.33%，远低于其他组。蛋黄组前期的成活率尚可，随着培育时间的延长，蛋黄已不能为大银鱼所摄食，死亡逐步升高，40 d后成活率降至17.67%。轮虫组的成活率最高，达到78.67%，卤虫组成活率略低于轮虫组，为77.67%。

表4 不同饵料对仔鱼成活率的影响

3 讨论

3.1 不同地区受精率差异的影响

洪泽湖地段相比于墓东水库较为北一点，1月份时，洪泽湖地区气温约为零下5～10℃，而墓东水库地区则为1～10℃，袁新明等研究发现大银鱼属低温产卵类型,其最佳产卵水温2～4℃[6]。洪泽湖地区温度相对较低，水温在2～4℃之间的区域比较多，建议在受精时，在可行范围内，水温在2～4℃之间为会有最好的受精效果。

3.2 不同孵化方式对孵化率和出苗率的影响

每种孵化方式中设置3个小箱，鱼卵投放时，从中随机数出1 000个大银鱼卵置于每个小箱内，这些鱼卵中存在部分未受精卵，而未受精的鱼卵孵化至10 d后极易发生水霉病。受精卵随发育进行，卵表面出现细密的卵膜丝，极易于其他鱼卵相互黏连成一块，若其中粘附一个发生水霉病的未受精卵，就会导致整块鱼卵都发病。试验小箱内每天都需挑出未受精卵，而大的孵化设施内由于鱼卵较多，无法挑除未受精卵，两者之间孵化率有较大差异。

表2及表3可看出在四种孵化方式中室内孵化率远高于室外孵化率，而洪泽湖地区孵化率全部高于墓东水库孵化率，所以室外孵化效果较差，而室内效果则好一点。可以推测阳光对于大银鱼鱼卵孵化率有害，即大银鱼卵孵化最好放在阴凉地方，而在室内的3个方式中，室内水泥地孵化率最好。韩广建得出的结论可以确定，受精率对受精卵在网箱内的存活率有明显影响。分析认为，当网箱附着生物后，网箱内外的水交换能力明显降低，未受精卵的死亡、腐烂污染网箱内水质会造成不良影响受精卵受霉菌感染及腐烂的程度[7]。水泥地中有很多泥沙，使受精卵可以被分开，不容易堆积在一起，水霉病没有办法传播。而网箱和塑料箱比较光滑，鱼卵容易移动，堆积在一起，水霉病容易传播。

3.3 不同饵料对仔鱼成活率的影响

由表4可知在喂养时间段内，对照组的问题在于没有食物，早期仔鱼有卵黄提供生长所需营养，并且不开口食用食物，所以前期各种喂养的效果是一样的[12]。然而到了中后期，因为卵黄消耗干净，没有食物及营养供给，所以对照组大量死亡，而蛋黄组也是大量死亡，所以大银鱼对于蛋黄并没有过多的食用，卤虫和轮虫喂养效果则一直很好。关于大银鱼仔鱼早期是否摄取浮游植物一直有争议，易建国[9]等认为，大银鱼仔鱼不能利用藻类。而朱成德[9]报道的大银鱼仔鱼肠道出现少量浮游植物相吻合。荣长宽[10]等亦报道野外水体大银鱼仔鱼对小球藻、衣藻有一定量的摄入。尤杨[11]表示大银鱼仔鱼早期是以浮游植物作为开口饵料，逐步过渡到捕食轮虫这也印证了仔鱼在口器的不同发育阶段摄食不同的适口饵料。而卤虫幼虫和轮虫在大小上差不多，而且2种饵料对于大银鱼前40 d的喂养效果相近，暂可认为卤虫和轮虫作为本研究中最好的饵料，之后的喂养效果需后人继续研究。

4 小结

在该研究中，一共研究了在不同的环境下大银鱼卵的孵化率和不同饵料对于大银鱼仔喂养的成活率。最终得出本研究的结论，在4种不同方式的孵化中，室内水泥池孵化效果最好，室内网箱和塑料箱效果次之，室外水库最差。所以建议大银鱼人工孵化在室内进行比较好。而对于不同饵料喂养的研究，从研究结果来说，轮虫和卤虫喂养效果最好，而蛋黄效果比较差，所以不建议用蛋黄来喂养，即用轮虫卤虫喂养比较好。