一种简便的菌种保藏方法:每五年传代一次的菌种维护管理方案

发表时间:2022/12/10 04:11:53  来源:《粮食与饲料工业》杂志1996年第10期  作者:钟启平  浏览次数:4930  
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随着饲料工业的发展,固态发酵技术在活性酵母饲料,益生素,酶制剂等一些饲料产品生产中得到了迅速的推广和发展,菌种退化则是一些企业经常发生的事。这里介绍一种菌种维护与保藏方法,经过多年的实践,证明它是一套行之有效,简单易行的管理方法。

1、 菌种的保藏

1.1 扣囊拟内孢霉,白地霉,皮状丝孢酵母及所有产孢子的真菌
取麦麸少许,按1︰0.8的比例加入自来水,用手搅拌均匀后,塞入10×100mm的试管中,塞到试管的1/3处为止,然后用棉塞塞住试管口,10支一捆用牛皮纸包扎好,于0.1—0.14Mpa的蒸汽压力下灭菌1小时,取出,置于无菌操作室或无菌操作柜中冷却。
然后在无菌条件下接入菌种,移入培养室(箱)中培养,培养成熟后,进入组装,成熟标志是扣囊拟内孢霉,皮状丝孢酵母,白地霉等为全管全长成白色,一般培养30—40小时即可全部长成白色,而产孢子的丝状真菌以全管长满丰厚的本色孢子为度,一般培养时间长达72小时。
菌种保藏的装置图见图一。组装前,18×180mm试管必须灭菌处理,橡皮塞最好也要事先灭菌,可用70%酒精溶液擦拭,烘干。氯化钙要事先在105度烘箱中烘干一小时。

组装完毕后,置于冰箱中于4度温度下保藏,可保藏4---5年不变质不退化。一般置于冰箱后,14天后麦麸曲种全部都会变干,所以该方法集干燥、低温、缺氧三种功能于一体,有效地防止了菌种的退化,使用时也很方便易行。

1.2 其它酵母菌
如假丝酵母,掷孢酵母,铁红酵母,啤酒酵母,产香酵母及其它一些能产生特异物质的酵母(如产虾青素的红发麸酵母)等。具体保藏方法同上所述,只是培养基中补充0.5%的葡萄糖即可。

1.3 细菌,放线菌等
可采用砂土管保藏法,本文略。

2、菌种的维护管理方案
有一个正确而规范的管理菌种的方法是保证产品质量的前提之一,基本原则之一是尽量减少传代次数。采用下面的工艺流程可达到这一目的。见下图二。
一般来讲,五年后保藏种不会退化,只需取一支,转接到加富培养基上培养一次,再做生产用的斜面菌种,同时又可做出发菌种作出下一个五年用的24支组装式保藏种,如此循环往复下去。
所以从流程中可看出,每五年实际才传代转管一或二次,把菌种自然变异退化的几率减少到最低的程度,不失为一套较为规范科学的菌种维护管理方案。

图二

(来源:《粮食与饲料工业》杂志1996年第10期,钟启平)

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