鱼类诺卡氏菌病的治疗
诺卡氏菌(Nocardia seriolae)是一种革兰氏阳性丝状杆菌,广泛分布于土壤、水体、空气、腐烂植物和动物粪便中,是一种机会致病菌。目前,从各地分离到的致病菌包括星状诺卡氏菌(Nocardiaasteroides)、杀鲑诺卡氏菌(Nocardia salmonicida)和鰤鱼诺卡氏菌(N. seriolae)三大类别。最近报道显示危害最严重的为鰤鱼诺卡氏菌(N. seriolae)。诺卡氏菌为兼性胞内寄生菌,主要通过鳃、口腔和创伤、饵料等途径感染,当然,人工注射诺卡氏菌菌液也是可以的;其感染后的主要特征为鱼体苍白并会引发体表溃烂及内脏器官长满大量的白色结节(图1);在感染过程中诺卡氏菌潜伏周期长,往往发病初期症状不明显,当出现病症时就已经无法控制;感染后治愈率低,感染后的死亡率几乎是100%。
发病乌鳢内脏(示脾脏上白色结节 )
目前对于鱼类诺卡氏菌病的治疗主要集中在抗生素,中草药和疫苗治疗上:
1、抗生素治疗
蒋依依(2012年)用纸片扩散法对从加州鲈体内分离的鰤鱼诺卡氏菌菌株NH090627进行药敏研究,结果显示该菌对氯霉素、卡那霉素、四环素等最敏感,但对磺胺类和氨苄青霉素具有耐药性。满其蒙等(2013)对恩诺沙星、红霉素及氟苯尼考体内治疗鲳鲹的鰤鱼诺卡氏菌疗效进行研究,治疗1组和治疗2组分别在感染后1天和4天投喂药饵,连续投喂10天,恩诺沙星、红霉素及氟苯尼考治疗1组和治疗2组对卵形鲳鲹鰤鱼诺卡氏菌感染的保护率分别53.34%和13.34%、43.34%和30%、60%和23.34%。另外满其蒙对15株鰤鱼诺卡氏菌进行了药敏检测,结果显示,15株菌均对庆大霉素、恩诺沙星、链霉素及卡那霉素敏感,对氨苄西林耐药。王二龙等(2015)用药敏纸片法测定鰤鱼诺卡氏菌对22种抗生素的敏感性,结果显示鰤鱼诺卡氏菌对四环素、强力霉素、美满霉素、阿奇霉素、磺胺异噁唑、利福平等敏感,对红霉素、呋喃唑酮、复达欣、妥布霉素中度敏感。但是随着抗生素的使用弊端也越来越明显。随着抗生素的不断使用,其治疗效果逐渐不佳,由于不合理使用化学类药物导致耐药菌增加,使防治鱼类诺卡氏菌病变得更加困难;且存在着环境污染及食品安全等问题。
2、中草药
Ismail TF等(2017)从肉桂、百里香、麦冬和茶树中提炼出4种植物精油,对鰤鱼诺卡氏菌ATCC43993、杀鲑诺卡氏菌ATCC27463和星形诺卡氏菌ATCC19247共80株诺卡氏菌进行药敏试验,肉桂精油、百里香精油、麦冬精油和茶树精油对星形诺卡氏菌最小抑菌浓度(MIC)分别可达5、10、20、160微克/毫升;百里香精油和肉桂精油联用时对鰤鱼诺卡氏菌和杀鲑诺卡氏菌MIC分别为10微克/毫升和80微克/毫升。邓剑豪等(2018)使用二倍稀释法测定中药复方DS对诺卡氏菌的MIC值,结果为3.91毫克/毫升。从中药理论及目前研究来看,中草药对于诺卡氏菌病主要在预防。由于中草药作用机理复杂,现代化技术低,药品难以向精确化、成品化发展,且中草药作用周期较长,所以难以快速准确的对鱼病实现有效防治。
3、 疫苗治疗
从世界范围来看,鱼类诺卡氏菌疫苗的研发进程都不甚理想,但是相对于抗生素来说要高效、安全、环保
彭程远等(2013)将鰤鱼诺卡氏菌全肽聚糖(WPG)由腹腔注射进乌鳢体内,乌鳢血细胞吞噬指数(PI)、血清替代途径补体活力(ACH50)以及组织中酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、超氧化物歧化酶(SOD)、溶菌酶(LSZ)等活力明显提高,鰤鱼诺卡氏菌WPG腹腔注射免疫7、21、35天后用鰤鱼诺卡氏菌进行攻毒,对乌鳢的保护率分别为35%、55%、60%,对照组20天内全部死亡。解俊等(2013)把灭活鰤鱼诺卡氏菌注射进乌鳢体内,发现乌鳢血细胞数呈先升高、后降低的变化趋势,在实验第12天时注射组血细胞数显著高于对照组;血清总蛋白含量在实验第9天后均高于对照组;血清碱性磷酸酶、酸性磷酸酶、超氧化物歧化酶和溶菌酶等活性在实验时间内均发生了显著的提高。NayaSK等(2014)把亚灭活和灭活(抗原形式)的鰤鱼诺卡氏菌注射进银鲫鱼腹腔内,在接种3天后,银鲫鱼的脾和头肾CD8α(+)T细胞百分比明显提高,血液中IgM抗体数量也明显增加,接种15天后银鲫鱼体内抗体水平达到最高,随后下降,接种亚灭活和灭活(抗原形式) 鰤鱼诺卡氏菌(1.2×106CFU/毫升)的鲫鱼存活率分别为62.5%和75%;用重组干扰素通过腹腔注射银鲫鱼1天后,用不同剂量的鰤鱼诺卡氏菌(1.2×106CFU/毫升和5×106CFU/毫升)攻毒,银鲫鱼存活率分别是43.75%和60%。ChenJL等(2019)以一种常见的免疫原性蛋白为抗原,研制了一种鰤鱼诺卡氏菌疫苗,把疫苗通过肌肉注射进乌鳢体内7天后到达肾、脾和肝脏等器官并刺激抗体的形成,血清溶菌酶、过氧化物酶、酸性磷酸酶、碱性磷酸酶和超氧化物歧化酶的活性明显提高,免疫相关基因(MHCIα、MHCIIα,CD4、CD8α、IL-1β、TNFα)高度表达,用鰤鱼诺卡氏菌感染接种过疫苗的乌鳢存活率为79.33%,对照组存活率为44.67%。MatsumotoM等(2017)把福尔马林灭活的鰤鱼诺卡氏菌和白介素-12混合注射到琥珀鱼体内,发现Th1和Th2相关基因明显表达,灭活的鰤鱼诺卡氏菌和白介素-12在琥珀鱼体内诱导了Th1型免疫,琥珀鱼在接种疫苗10天内Th1细胞对鰤鱼诺卡氏菌的免疫力持续存在,激发试验结果表明,接种鰤鱼诺卡氏菌和白介素-12的琥珀鱼在注射鰤鱼诺卡氏菌后34天存活率为88%,而对照组全部死亡。
参考资料
[1]满其蒙. 鰤鱼诺卡氏菌致病机制的研究[D].上海海洋大学,2013.
[2]陈言峰,范祖游,王子涛,洪煜宇,付立霞,张辉华.水产动物诺卡氏菌病防控技术的研究进展[J].安徽农业科学,2015,43(13):170-172.
[3]Pei-Chi, W., Ming-An, T., Yu-Chi, L., Yanting, C., and Shih-Chu, C.(2014). Nocardia seriolae, a causative agent of systematic granuloma in spottedbutterfish, Scatophagus argus, Linn. African Journal of Microbiology Research8.
[4]蒋依依,
[5]彭程远, 解俊, 金珊, 赵青松, 陈寅儿, and 王国良 (2013). 鰤鱼诺卡氏菌全肽聚糖对乌鳢非特异性免疫力的影响. 动物营养学报 25, 2150-2159.
[6]解俊, 彭程远, 金珊, 赵青松, 陈寅儿, 王锡波, and 王国良 (2013). 灭活鰤鱼诺卡氏菌对乌醴非特异性免疫指标的影响. 渔业科学进展 34, 71-76.
[7]陈海新,朱宇嘉,董
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