金鱼繁殖研究进展
金鱼繁殖研究进展
李彩刚 邓勇辉 黄江峰 章海鑫 金霞
(江西省水产科学研究所,江西南昌 330039)
金鱼(Carassius auratus Linnaeus),在动物分类学上属鲤形目(Cypriniformes)、鲤亚目(Cyprimoidei)、鲤科(Cyprinidae)、鲤亚科(Cypriniae)鲫属(Carassius)。金鱼是世界著名三大观赏鱼类之一,发源于中国,至今已有1700 多年历史[1]。金鱼颜色丰富,形态优美,深受人们喜爱;由于科研人员和爱好者的长期培育,品种逐渐增多,国内的主要金鱼品种有143 种,分13 类[2]。近年来,金鱼养殖在全国各地有了很大的发展,除西藏外全国各省、直辖市、自治区均有生产性养殖,其主要产区分布于北京、上海、苏州、杭州、广州、东莞、福州等地。由于金鱼的观赏价值大,市场前景好,金鱼繁殖越来越受到广大科研人员的关注。研究金鱼的繁殖技术,可以探索提高金鱼的繁殖能力,开发培育新品种,以促进产业发展。
1 亲鱼选择
1.1 年龄选择
亲鱼选择是提高受精率、孵化率和纯化品种的关键性技术。彭德姣等[3]研究证明一龄金鱼已达性成熟,能产生成熟的卵子和精子,并在自然和人工环境下都能够自行繁殖后代;羊茜[4]认为虽然有的1龄金鱼性腺已经发育并具备产卵排精的条件,但其后代往往畸形率高;王楚松[5]、丁美娟[6]等大多数学者均采用2~4龄金鱼作为亲鱼;李兴辉和彭文华[7]、梁拥军等[8]采用1~2龄雄鱼和2~4龄雌鱼的以新雄老雌搭配为亲鱼,认为1龄的雌鱼卵粒小,雄鱼精子活力强,2~4龄雌鱼卵子活力强,产卵数量多,受精率和孵化率高最适宜做亲鱼,5龄以上的鱼已超过繁育旺盛期,不宜作亲鱼。
1.2 外形选择
亲鱼外形选择一般包括形态、动态、色彩、健康、规格五个方面。亲鱼形态特征标准应为品系纯正优良,特征明显,身体均匀,体型、尾型标准。羊茜[4]认为动态标准为:游姿端正匀称、典雅大方、姿态柔和优美,反应敏锐,动感极强。崔松[9]认为色彩标准为:色彩以通体浓艳鲜明为佳。单色鱼要求色纯无瑕斑;红色鱼要从头至尾通红似火;墨色鱼要乌黑闪光;双色鱼要色块相间而不乱;鹤顶红全身银白,头顶肉瘤端正,红如五月榴花。选择体格健壮,无伤无病,鱼体无霉斑,鳞片完整,无掉鳞现象的亲鱼。马小荣,严维辉[10]等认为体格标准为:体长应在10cm 以上,最好达到15cm 以上,且雄鱼小于雌鱼。
2 亲鱼培育
2.1 培育方式
金鱼亲鱼的培育和金鱼的养殖不同。焦广生等[11]等部分学者采用雌雄混养方式,朱锡和、王崇华[12]采用先雌雄同池放养两周后再分池单养。而由于雌雄亲鱼在一起饲养时,雄鱼发育较快,性成熟得早,两者发育不同步,产卵率不高,同时避免雌雄鱼过度亲密接触,导致提前产卵甚至流产的现象发生;大多数学者[13、14]采用雌雄亲鱼分池培育方式,培育密度为10cm 左右的高档亲鱼12~15尾/m3,一般亲鱼20~30尾/m3[8],在临产前2~3d 合群,以提高金鱼繁殖效果。也有报道[15]为避免金鱼长期养在鱼池中,使金鱼产生“野性”和改变体型呈现“返祖”现象,而采取鱼池与鱼缸各轮养30d的方法,既促进了幼鱼快速生长,又不会改变其体型。
2.2 培育管理
亲鱼饲料一般用蛋白含量30%左右的市售浮性颗粒料,应富含丰富的维生素,同时适当投喂水蚯蚓,枝角类和挠足类等浮游动物,促进亲鱼精巢、卵巢发育,增强鱼体免疫力[16]。培育过程中坚持经常性清污,清除残饵废物,每隔1 周换水1次,每次换水1/6 左右,同时做好控温、保温工作,应使水温保持在14~22℃之间[8],换水时新、旧水温差不得超过1℃[17、18]。每日增加溶解氧,适时检测水质,用生石灰等碱性药物泼洒,将pH 值调至7~8 左右的微碱性[15],确保溶解氧5mg/L 以上,氨氮及亚硝酸盐小于0.1mg/L[8],有利于亲鱼快速生长和增强体质。春季金鱼易得白点病、烂鳃病、水霉病等,可在水中放人微量食盐(按每50kg 水中放食盐3~5g)或少量青霉素、卡那霉素[19],也可每隔5d 泼洒聚维酮碘,对预防鱼病均能收到较好的效果。
3 繁殖环境
3.1 繁殖亲鱼挑选和雌雄配比
用来繁殖的亲鱼雌鱼要挑选体质健壮,生殖孔微有红肿,腹部膨大且稍软,卵巢轮廓明显的个体;雄鱼选体质健壮,追星明显,轻压腹部生殖孔有精液流出的个体[10]。虽然马冬梅[13]采用雌雄3:1的比例配组进行人工授精时授精率可达到80%以上。但由于在繁殖过程中,雄鱼要追逐顶撞雌鱼,需要高强度的体力,加之金鱼属体外受精,易受外界干扰,精卵结合率不高,所以目前大多数学者采用雌雄比为1:1~3的雄鱼多于雌鱼的配 比 组 合[16、20、21],并 尽 可 能 采 取 远 缘 交 配法[22],以创造和利用杂种优势,培育新品种。同时王春元、陈幼臣和白琴华[23]研究表明:金鱼尾鳍和体长均表现为母本性状,由母本性状所影响、所决定,这对我们在金鱼的杂交育种上的母本选择具有一定的指导意义。
3.2 繁殖外界条件
亲鱼产卵的时间受气温、水温、水质、气压、光线、异性刺激等诸因素影响,可人工调控这些生态因子从而促使亲鱼集中产卵,以达到缩短繁殖时间,提高产卵率和孵化率的目的[24]。虽有报道金鱼的繁殖行为发生在早晨6:00-10:00[8],但大多数学者研究认为金鱼产卵旺盛时间为凌晨2:00-6:00[16、17、25],产卵最合适的水温是18~20℃[24],当水温低于10℃或高于29℃时,金鱼产卵过程则会中断[26],同时采取采光角为21℃左右的琴弦式日光照射[27]和冲水刺激[13、28],以及选择天气晴朗、气压高爽的天气繁殖,避免因低压、闷热天气抑制亲鱼产卵[26],降低亲鱼产卵量。
3.3 繁殖场地及鱼巢准备
金鱼繁殖场地多见12m× 6.5m[28]、5m×8m[21]等大中型池塘,也有面积为3m×8m[29]、3m×4m[30]的较小池塘,并都取得了一定的效果。但金鱼性情温顺娇贵,在小水体下繁殖更有利于金鱼的产卵和孵化。笔者在2011-2013年开展了小水体(100cm×60cm×40cm)金鱼的繁殖试验,通过控制光照、水温、水质、冲水刺激等条件,取得了良好的繁殖效果。金鱼繁殖的鱼巢制作各有不同,主要有金鱼藻、轮藻、红根苔草[16]、水葫芦、棕丝、麻丝、柳树根(须)[31]、毛线、塑料绳[32]及筛绢[33]制作,使用金鱼藻等植物鱼巢还可以借助水草进行光合作用,增强水中的氧气,而且还因水草上浮使金鱼卵直接受到光照,加速胚胎发育[6]。鱼巢必须用高锰酸钾等消毒液浸泡或者经高温蒸煮处理后洗净晾干使用,以防止受精卵被细菌、寄生虫感染而产生水霉等疾病,影响金鱼孵化率。
4 繁殖方法
4.1 自然繁殖
将经过挑选及配对的亲鱼放入产卵池中,若出现雄鱼偶尔跟随雌鱼尾部,且慢慢变得频繁追逐和顶撞时,说明亲鱼临近产卵,此时立即将鱼巢悬挂固定在产卵池中央或周边,并让其悬浮于水中。当雄鱼激烈追逐雌鱼,达到极度兴奋时,雌鱼便游到鱼巢上部摩擦,并尾部用力甩动排出大量透明呈淡黄色卵;同时雄鱼立即颤动排出乳白色精液,在水中扩撒后迅速与卵子结合形成受精卵,并粘在鱼巢上完成授精。
4.2 人工繁殖
4.2.1 人工催产
人工催产技术是金鱼人工繁殖顺利进行的关键。金鱼的人工催产方法一般采用胸鳍基部注射法(胸腔注射),一般为左手托鱼,大拇指拨开胸鳍,将注射针以45°角[25]斜扎入胸鳍凹处,注入胸腔(忌太深,以免刺破心脏)[34]。金鱼注射药物主要有促黄体素释放激素类似物(LHRH-A2)、绒毛膜促性腺激素(HCG)、地欧酮(DOM)和鲤鱼脑垂体(PG)等,但各地药物配制组合比较多样,未形成统一的配制组合。朱锡和,王崇华等[12]选择以上四种药物组合配制,王芳等[33]采用LHRH-A2和DOM 两种药物配制,汪学杰,牟希东[32]采用LHRH-A2和HCG 两种药物配制,均能取到较好的催产效果。注射催产药物计量一般根据体重确定,且雄鱼剂量为雌鱼一半,LHRH-A2剂量为3~5ug/kg[21、35],HCG:150~200IU/kg,DOM:0.3~0.5mg/kg,PG:0.5~1.0mg/kg[10]。笔者经过3年的小水体金鱼繁殖试验,采取LHRH-A2:3.0~4.0ug/kg,HCG:1000IU/kg,DOM:1.0mg/kg 三种催产药物组合的方式进行人工催产,亲鱼产卵量有效增加,取得了良好的催产效果。
4.2.2 人工授精
4.2.2.1 干法授精
当雌雄亲鱼达到效应时间,轻挤雌鱼腹部有卵粒顺利流出,说明鱼卵成熟即可授精。首先准备一只经消毒的瓷盆或瓷碗,用干的软毛巾擦干鱼体表面,用大拇指和食指由胸鳍向臀鳍方向轻挤腹部,使鱼卵流入盆(碗)中,3尾左右为一批;马上取雄鱼轻挤腹部,使精液挤入盛有卵的盆(碗)中,用干净的毛笔或羽毛轻轻搅拌,使精子和卵子充分结合完成授精,并将受精卵均匀铺洒在孵化池的鱼巢上孵化。也有报道[9]先挤入少量雄鱼精液后,马上挤净雌鱼卵粒,最后再边挤入精液边搅拌,使精卵充分接触2~3min 后,脱粘处理再放入孵化池中。
4.2.2.2 湿法授精
当雌雄亲鱼达到授精条件时,准备好一个经消毒盛好1/3~2/3 老水的脸盆,在盆底放置处理好的鱼巢,在水中用手挤净雌鱼卵粒于盆中,立即边挤压雄鱼腹部使其精液流出,边用羽毛在水中轻轻搅动,使精卵在水中完成授精并粘附在鱼巢上,最后转入孵化池中。也有报道[22]用两手分别抓住雌雄亲鱼,使其生殖孔相对并挤压精、卵,使其在水中同时结合。王芳[35]在琉金与龙睛的杂交中采取湿法授精方式,取得了89%~95%的受精率。
4.2.2.3 人工雌核发育
人工雌核发育是指人工使遗传上失活的精子进入未受精的成熟卵后引起卵细胞的雌核发育,其后代形状与母本极其相似。80年代起,我国人工雌核发育研究多见于在草、鲫和鲢鱼等鱼类[36、37],而近年来,金鱼人工雌核发育有了较快的发展[38~40]。人工雌核发育的方法[39~41]是首先对精子进行失活处理,可以采用噻唑、甲苯胺γ 啶黄、二甲基硫酸盐、乙烯脲等化学药物或x 射线、γ射线、紫外线照射等物理辐射处理,一般采用紫外线照射的方法,具体操作是用Hank's 液(1:3)稀释精液后,均匀涂在4℃预冷的培养皿中,精液厚度控制在0.1mm 左右,用15W的UV 灯进行照射并摇床,照射时间为25~30min,期间每隔3~5min中用显微镜观察精子活力,处理过的精液盛在4℃环境下的遮光瓶子中;其次进行卵子染色体加倍处理,可以采用热休克法、静水压法和秋水仙素处理法[42]等,一般采用冷休克法,具体操作是用处理好的灭活精子激活卵子2~5min 后,放入1~4℃的冷水中处理20~40min,抑制第二极体排出的方法使卵子染色体加倍。经人工雌核发育处理的金鱼受精率约为50%~65%[40、41]。
5 小结
(1)通过选择1~2龄雄鱼和2~4龄雌鱼的新雄老雌亲鱼,采取雌雄分养的方式,合理放养密度,加强高蛋白饲料和动植物性饵料的投喂,保持合适的水温,充足的光照以及维持清新的水质环境,同时加强亲鱼疾病的预防等措施,强化亲鱼产前培育,有利于提高金鱼怀卵量。
(2)在繁殖过程中,采取雌雄比为1:1~3的雄鱼多于雌鱼的配比组合及尽可能的采取远缘交配法,可以提高金鱼受精率;同时选择晴朗的天气,合适的鱼巢,采取冲水刺激等方式可以提高金鱼产卵量。
(3)采用金鱼自然繁殖方法操作最为简便,在大批量的繁殖生产中容易实施,并能避免亲鱼因人工繁殖而受伤,大大降低亲鱼产后死亡率。人工繁殖方法相对复杂,工作量较大,但产卵量比自然繁殖明显增多,在人工繁殖的三种人工授精方式中,湿法授精方式能最大程度的减轻亲鱼受伤程度,受精率较高,而人工雌核发育受精率相对较低,现阶段人工雌核发育正处于研究试验阶段,但其得到的后代能很好的获得遗传母本的优良性状,具有较高的纯度,发展前景很好。
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